血液成分病毒滅活,在保證醫(yī)療衛(wèi)生的角度上,是保障血液成分安全的重要意義。
血液病毒滅活技術(shù)是對血液制品(指以人的血液為原料制備的制品)生產(chǎn)過程以及特定的去除/滅活病毒方法,包括指示病毒和病毒祛除/滅活方法的選擇、驗證方案的設(shè)計、結(jié)果判斷等等,目前已知經(jīng)過血液制品傳播的病毒主要有HBV、HCV、HIV-1、HIV-2、HTLV和B19等。
經(jīng)血液傳播疾病的相關(guān)病毒及指示病毒(例)
病毒 |
基因組 |
脂包膜 |
病毒直徑 |
舉例病毒 |
HIV |
RNA |
Y |
80-100nm |
AIDS |
HBV |
DNA |
Y |
45nm |
鴨乙型肝炎病毒、偽狂犬病毒 |
HCV |
RNA |
Y |
40-60nm |
Sindbis病毒 |
HAV |
RNA |
N |
27nm |
HAV、脊髓灰質(zhì)炎病毒、腦心肌炎病毒(EMC) |
B19 |
DNA |
N |
20nm |
犬細小病毒 |
在血液檢測的領(lǐng)域里,血液制品雖然經(jīng)過病毒檢測,但病毒經(jīng)血液傳播的危險性依然存在,醫(yī)療環(huán)境里,各種內(nèi)外部因素容易直接導致血液制品的污染,檢驗方法與試劑靈敏度局限,窗口期問題,病毒檢測種類局限,新病毒的出現(xiàn)等等,致使血液檢測結(jié)果出現(xiàn)一定偏差性,有效的血液病毒滅活殺菌在一定程度上可以降低經(jīng)血液傳播疾病和防止檢測偏差的風險。為了提高血液制品安全性,醫(yī)療領(lǐng)域里對于血液的檢測以及再加工要具有一定的祛除/滅活部分病毒的技術(shù)手段,生產(chǎn)過程中應用特定的祛除/滅活病毒方法。
血液制品安全現(xiàn)狀(病毒漏檢風險系數(shù))
乙肝(HBV) |
丙肝(HCV) |
AIDS (HIV) |
|
國際(日本) |
1/10000~1/100000 |
1/1000000~1000000 |
1/1000000~1/10000000 |
國內(nèi) |
1/3000000 |
1/4000000 |
1/50000000 |
數(shù)據(jù)來源于2019年網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)文獻,如有偏差,敬請指出。
如何選擇血液制品去除/滅活病毒的技術(shù)方案,由于不同血液制品潛在的污染病毒的可能性不同,為此選擇病毒去除/滅活方法的側(cè)重點也應有不同。在現(xiàn)有醫(yī)療技術(shù)背景之下,主要有以下幾種:
(一)巴斯德消毒法(巴氏消毒法)
主要應用于人血白蛋白制品以及其他血液制品(液體制劑)。由于血液制品的組成、穩(wěn)定劑量(如枸櫞酸鹽、氨基酸、糖等)及制品濃度高低,均會對滅活病毒效果有一定的影響。因此在采用巴氏消毒滅活病毒方法時必須進行病毒滅活效驗證。幾十年的臨床應用結(jié)果表明,白蛋白采用巴氏消毒法對HIV和肝炎病毒是安全的,但是在采用巴氏消毒法時必須對所用設(shè)施進行驗證,是巴氏消毒各參數(shù)符合要求,包括制品內(nèi)溫度分布的均一性和滅活時間。
(二)干熱法
使用干熱法可對血液制品進行病毒滅活,例:對血液制品進行80℃連續(xù)加熱72小時,可以滅活包括HBV、HCV、HIV等病毒。
(三)有機溶劑/去污劑(S/D)處理法
有機溶劑,如磷酸三丁酯(TNBP)和非離子化的去污劑,ritongX-100或吐溫-80結(jié)合可以滅活脂包膜病毒,但對非脂包膜病毒無效。
(四)紫外線殺菌燈UVC輻射殺菌法
紫外線作為一種廣譜的殺菌方式,殺菌原理是利用適當波長的紫外線能夠破壞微生物機體細胞中的DNA(脫氧核糖核酸)或RNA(核糖核酸)的分子結(jié)構(gòu),造成生長性細胞死亡和(或)再生性細胞死亡,達到殺菌消毒的效果。紫外線消毒技術(shù)是基于現(xiàn)代防疫學、醫(yī)學和光動力學的基礎(chǔ)上,利用特殊設(shè)計的高效率、高強度和長壽命的UVC波段紫外光照射,將水中、空氣及物體表面各種細菌、病毒、寄生蟲、水藻以及其他病原體直接殺死。紫外線輻射可使細菌病毒DNA、RNA的堿基生成二聚體或加成物而抑制病毒復制,病毒下降滴度與光輻射強度及暴露時間有關(guān)。在早期研究中,紫外線滅活病毒的同時也會滅活血漿蛋白而被一度叫停,而隨著科學的進步,研究人員嘗試在實驗前加入蛋白質(zhì)保護劑,使蛋白質(zhì)免受紫外輻射而降低,或充分掌握輻射劑量和暴露時間,使短波紫外線(UVC)對病毒,在血漿蛋白損傷不大的前提之下,尤其是對無包膜病毒可以達到很好的滅活效果。
紫外線UV對常見細菌病毒的殺菌效率(紫外線輻射強度>30mj/c㎡)
種類 |
名稱 |
100%滅殺需的時間(秒) |
? ? ? 細菌類 |
炭疽桿菌 |
0.30 |
破傷風桿菌 |
0.33 |
|
痢疾桿菌 |
0.15 |
|
大腸桿菌 |
0.36 |
|
沙門氏菌屬 |
0.51 |
|
智賀氏菌屬 |
0.28 |
|
? ? ? ? 病毒類 |
流感病毒 |
0.23 |
吞菌胞病毒 |
0.20 |
|
輪狀病毒 |
0.52 |
|
乙肝病毒(HBV) |
0.73 |
|
? 丙肝病毒(HCV) |
60 (輻照強度≥60 μW/cm2) |
|
AIDS(HIV) |
||
愛柯病毒 |
0.73 |
|
? ? 霉菌孢子 |
曲霉屬 |
0.73-8.80 |
大糞真菌 |
8.0 |
|
毛霉菌屬 |
0.23-4.67 |
|
黑曲霉 |
6.67 |
血液病毒滅活/qu去除的方法還有膜過濾法和低pH孵放法,我們不作深入講解。
LONGPRO朗普科技研發(fā)的低壓直流DC12V/24V紫外線殺菌燈,紫外單燈強度高,殺菌時間短,擁有紫外線快速選型發(fā)明專利。該款紫外線燈的研發(fā)過程中,朗普科技根據(jù)血液滅活殺菌應用領(lǐng)域以及使用模式,研制了智能款、通用款等兩款通用紫外線燈。DC12V/DC24V型號紫外線燈單燈輻射強度高,殺菌時間短,細菌滅殺率高,耐啟動沖擊,開關(guān)使用壽命達到10000次以上(朗普實驗測試數(shù)據(jù))。其中智能款配備朗普低壓放電燈專利技術(shù)的預熱啟動電路,優(yōu)化安全匹配不同型號的紫外線燈,電子粉損耗更少,不易黑頭,開關(guān)次數(shù)>10000次(朗普實驗測試數(shù)據(jù)),更高紫外輸出=更少殺菌燈+更低系統(tǒng)成本+更低維護成本,有效適用于血液滅活領(lǐng)域的殺菌處理,
如今,血液制品安全性的保證是主要的目的,而病毒的有效去除/滅活的環(huán)節(jié)至關(guān)重要,由于單一病毒去除/滅活方法存在或大或小的局限性,存在對有些病毒(尤其是非包膜病毒)不能完全滅活的可能性,因此目前血液制品生產(chǎn)過程中一般采用兩種或以上的病毒去除/滅活的技術(shù)相結(jié)合,更有效、安全地保證血液制品的安全。紫外線UVC血液滅活技術(shù),作為現(xiàn)如今最為快捷、高效、低成本的血液滅活方法之一,已經(jīng)在血液生產(chǎn)提取研究各個領(lǐng)域里得到廣泛的應用。